高速大容量冷凍離心機(jī)梯度的制備方法有階梯梯度法、混合梯度法和離心平衡法等。
一、階梯梯度法:
手工由底部向上分層加入漸濃的介質(zhì)溶液,由于擴(kuò)散作用自然形成連續(xù)梯度。擴(kuò)散時(shí)間受溫度、階梯厚度和階梯密度差的影響。
二、混合梯度法:
利用自動(dòng)梯度儀自動(dòng)調(diào)節(jié)梯度斜率、形狀和濃度,可同時(shí)制備多個(gè)梯度。制成的梯度放置過久,梯度形狀和斜率會(huì)發(fā)生變化。
三、離心平衡法:
離心時(shí)把密度均一的介質(zhì)溶液和樣品混合后裝入離心管中,通過離心形成梯度,讓顆粒在梯度中進(jìn)行再分配。離心達(dá)到平衡后,不同密度的顆粒在梯度中各自分配到其等密度點(diǎn)的位置上,形成不同的區(qū)帶。
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